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免疫球蛋白：指具有抗體活性的動(dòng)物蛋白。主要存在于血漿中，可溶性免疫球蛋白存在于體液中，參與體液免疫 ，也見于其他組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白（γ-球蛋白）中。免疫球蛋白可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類。

人體血清免疫球蛋白IgG是初級(jí)免疫應(yīng)答中最持久、最重要的抗體，它僅以單體形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗體屬于IgG，它在抗感染中起到主力軍作用，它能夠促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的吞噬作用（調(diào)理作用），中和細(xì)菌毒素的毒性（中和毒素）和病毒抗原結(jié)合使病毒失去感染宿主細(xì)胞的能力（中和病毒）。IgG 在機(jī)體合成的年齡要晚于IgM，在出生后第3 個(gè)月開始合成，3-5 歲接近成年人水平。它是唯一能通過胎盤的Ig，在自然被動(dòng)免疫中起重要作用。此外，IgG 還具有調(diào)理吞噬和結(jié)合SPA等作用。

以下是賽智科技利用STI501高效液相色譜儀對(duì)豬血中免疫球蛋白IgG進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案。

（本應(yīng)用方案請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，侵權(quán)必究）

1、儀器與試劑

1.1儀器、設(shè)備

STI501高效液相色譜儀

蛋白柱

分析天平

PH計(jì)

容量瓶

針頭過濾器

微孔濾膜：0.45μm

1.2試劑

磷酸二氫鉀（AR）

磷酸氫二鉀（AR）

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品溶液的制備   取IgG標(biāo)準(zhǔn)品0..01g，用流動(dòng)相A溶解并定容至10.0ml，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，濃度為1mg/ml;取適量該儲(chǔ)備液用流動(dòng)相A稀釋成含IgG0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)系列，臨用時(shí)配制。

供試品溶液的制備  稱取一定量的血漿蛋白粉試樣約0.1g于容量瓶中，用流動(dòng)相A稀釋至25.0ml，搖勻，經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾后進(jìn)樣分析。

3、色譜條件

色譜柱：蛋白柱

流動(dòng)相：流動(dòng)相A:PH6.5，0.05mol/l磷酸鹽緩沖液

流動(dòng)相B：PH2.5，0.05mol/l甘氨酸鹽緩沖液

梯度洗脫程序見下表

波長(zhǎng)：280nm

流速：0.4mL/min

進(jìn)樣量：20ul

溫度：室溫

4、測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得

5、色譜圖