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硝基咪唑類（5- nitroimidazoles）藥物是畜禽飼料中常用的抗原蟲感染及抗菌藥，并具有促生長作用，但是該類藥物及其某些代謝物對哺乳動物具有致癌、致畸、致突變作用和遺傳毒性。飼料中硝基咪唑類藥物的不合理使用造成可食性動物組織中藥物殘留問題危害到人類的食品安全。

硝基咪唑類藥物是帶有硝基的咪唑化合物，為白色或淡黃色結(jié)晶，弱堿性，能和酸結(jié)合成鹽，遇光易分解，易溶于甲醇，微溶于水，主要用于預(yù)防和治療家禽的滴蟲病、豬的出血性下痢及厭氧菌感染。畜禽常用的硝基咪唑類藥物包括甲硝唑（metronida-zole, MNZ）、地美硝唑（dimertidazole, DMZ）、異丙硝唑（ipronidazole, IPZ）、洛硝唑（ronidazole, RNZ）、 奧硝唑（ornidazole, ONZ）、賽克硝唑（secnidazole, SCZ）和替硝唑（tinidazole, TNZ）等。這些藥物在動物體內(nèi)通過C2側(cè)鏈的氧化而被快速代謝，代謝物與原藥具有相似的潛在毒性。

硝基咪唑類藥物已報(bào)道的檢測方法有極譜法、免疫檢測法、薄層色譜法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜或串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜法、氣相色譜-譜或串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法等。

本方案分離檢測的9種四環(huán)素類抗生素：4-甲硝咪唑、2-甲硝咪唑、洛硝噠唑、HMMNI、甲硝唑、地美硝唑、氯甲硝咪唑、苯硝咪唑及異丙硝唑。

樣品處理過程：

動物肝臟、腎臟、肌肉組織及水產(chǎn)品：稱取均勻式樣10g（精確到0.01g），置50mL聚丙烯離心管中，加入20mL乙酸乙酯，混勻，渦旋振蕩提取2min，6000r/min離心5min，取上清液置雞心瓶中，剩余殘?jiān)俜謩e用20ml、10ml乙酸乙酯重復(fù)提取2次，合并提取液，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用8mL 0.5mol/L的鹽酸溶液溶解殘?jiān)尤?g磷酸氫二鉀，使其充分溶解，再加入10mL正己烷，渦旋振蕩2min，6000r/min離心10min，取下層清液，待凈化用。

凈化略。

色譜條件：

色譜柱：C18,  4.6 mm*250 mm，粒度5 μm

檢測波長：300nm

檢測溫度：35℃

流    速：1mL/min

流 動 相:  A：乙腈

           B：水

梯度洗脫

色譜圖