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四環(huán)素類抗生素(Tetracyclines)是由放線菌產(chǎn)生的一類廣譜抗生素，包括金霉素（Chlotetracycline)、土霉素（Oxytetracycline）、四環(huán)素（Tetracycline）、及半合成衍生物甲烯土霉素、強力霉素、二甲胺四環(huán)素等，其結(jié)構(gòu)均含并四苯基本骨架；廣泛用于多種細菌及立克次氏體、衣原體、支原體等所致之感染。四環(huán)素類抗生素在酸性和堿性條件下均不穩(wěn)定，四環(huán)素類藥物中含有許多羥基、烯醇羥基及羰基，在中性條件下能與多種金屬離子形成不溶性螯合物。與鈣或鎂離子形成不溶性的鈣鹽或鎂鹽，與鐵離子形成紅色絡合物，與鋁離子形成黃色絡合物。在體內(nèi)Tetracyclines藥物與鈣離子形成的絡合物呈黃色沉積在骨骼和牙齒上，小兒服用會發(fā)生牙齒變黃，孕婦服用后其產(chǎn)兒可能發(fā)生牙齒變色，骨骼生長抑制。因此小兒和孕婦對此藥因慎用或禁服。

關(guān)于國家標準中四環(huán)素的檢出限：

——動物源性食品中四環(huán)素（二甲胺四環(huán)素、土霉素、四環(huán)素、去甲基金霉素、金霉素、美他環(huán)素及多西環(huán)素）的檢出限——50μg/kg；

——化妝品中四環(huán)素的檢出限：

二甲胺四環(huán)素—25mg/kg  定量限：50mg/kg

土霉素、四環(huán)素、去甲基金霉素——10mg/kg  定量限：25mg/kg      

金霉素、美他環(huán)素、多西環(huán)素——5mg/kg     定量限：10mg/kg 

脫水四環(huán)素、差向脫水四環(huán)素——2.5mg/kg   定量限：5mg/kg 

——牛奶及奶粉中土霉素、四環(huán)素、金霉素、多西環(huán)素的檢出限：

牛奶中：土霉素、四環(huán)素——5μg/kg

        金霉素、多西環(huán)素——10μg/kg

奶粉中：土霉素、四環(huán)素——25μg/kg

        金霉素、多西環(huán)素——50μg/kg

本方案分離檢測的11種四環(huán)素類抗生素：二甲胺四環(huán)素（MINO）、土霉素（OTC）、四環(huán)素（TC）、差向四環(huán)素（ETC）、金霉素（CTC）、差向金霉素（MCTC )、脫水四環(huán)素（ATC）、差向脫水四環(huán)素（ETAC）、甲烯土霉素（MTC）、去甲基金霉素（DMCTC）、多西環(huán)素（DC）。

樣品處理過程

動物肝臟、腎臟、肌肉組織及水產(chǎn)品：稱取均勻式樣5g（精確到0.01g），置50mL聚丙烯離心管中，分別用20mL、20mL、10mL 0.1mol/L EDTA-Mcllvainc 緩沖溶液冰水浴超聲提取三次，每次漩渦混勻1min，超聲提取10min，3000r/min離心10min（溫度低于15℃），合并上清液（控制總提取液的體積不超過50mL），定容至50mL，混勻，5000r/min離心10min（溫度低于15℃），用快速濾紙過濾，待凈化。

凈化：準確吸取10mL提取液（相當于1g樣品）以1滴/s的速度過HLB固相萃取柱，待樣液完全流出后，依次用5mL水和5mL甲醇-水淋洗，棄去全部流出液。2.0Kpa以下減壓抽干5min，最后用10mL甲醇+乙酸乙酯洗脫。將全部洗脫液氮吹干（溫度低于40℃），用適量的甲醇溶解殘渣，過0.45μm濾膜，待測定。

1-MINO, 2-ETC, 3-OTC, 4-TC, 5-DMCTC, 6-MCTC, 7-CTC, 8-MTC, 9-DC, 10-EATC, 11-ATC