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胭脂蟲紅是從生長在不同地區(qū)、不同類型的仙人掌上的胭脂蟲體內(nèi)提取的一種天然色素，并且是從雌胭脂蟲體內(nèi)提取的一種蒽醌衍生物，外觀呈紅色菱形晶體或紅棕色粉末，可用作食品、藥品及化妝品著色，特別是漱口劑、牙粉、撒粉、油膏，是我國認(rèn)可的食品添加劑。市場上銷售的胭脂蟲紅產(chǎn)品也有一些是呈深紅色粘稠液體。不溶于冷水，稍溶于熱水或乙醇，能溶于堿不溶于稀酸、乙醚、氯仿、苯，在堿與稀酸中，色澤隨溶液的pH而變化，酸性時(shí)呈橙黃色，中性時(shí)呈深紅色，堿性時(shí)呈紫紅色。

國家質(zhì)檢總局近日公布最新一批不合格進(jìn)口食品、化妝品黑榜單，248批進(jìn)口食品、8批化妝品被拒國門外，其中包括來自新西蘭、阿根廷等國的乳制品，多國的嬰幼兒米粉產(chǎn)品也“榜上有名”，在此次公布的黑名單中，共有19批來自新西蘭的嘉仕堡巴氏殺菌高鈣脫脂乳、調(diào)制乳，存在違規(guī)使用胭脂蟲紅、菌落總數(shù)超標(biāo)等問題；針對(duì)此次嘉仕堡巴氏殺菌調(diào)制乳違規(guī)使用胭脂蟲紅的問題，食品專家推測(cè)，問題很可能出在添加劑量上。根據(jù)我國食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定，胭脂蟲紅色素有適用范圍，添加量也根據(jù)食品的種類不同有所不同。違規(guī)要么超范圍、要么超劑量使用，調(diào)制乳中是可以使用的，因此有可能是超劑量使用。除此之外，“榜上有名”的還有由比利時(shí)Belfine BVBA公司生產(chǎn)的16款巧克力，其在上海口岸進(jìn)行入關(guān)檢測(cè)時(shí)被檢疫部門檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該品牌巧克力的貝爾芬圣誕節(jié)巧克力條、瓢蟲巧克力棒、雪人巧克力棒等都存在違規(guī)使用“胭脂蟲紅”色素的問題，按照我國法規(guī)只能銷毀，對(duì)此中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院副教授朱毅推測(cè)，其違規(guī)原因很可能出在添加劑量上。因此建立一種穩(wěn)定、準(zhǔn)確、高效的胭脂蟲紅檢測(cè)方法十分必要。

 以下是賽智科技利用LC-10Tvp高效液相色譜儀對(duì)果汁中胭脂蟲紅進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案。方案僅供參考。

1、儀器與試劑

1.1 儀器

LC-10Tvp高效液相色譜儀。

Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm。

超聲儀。

pH計(jì)。

萬分之一天平。

針頭過濾器。

固相萃取儀。

HLB固相萃取小柱。

移液槍。

氮吹儀。

微孔濾膜：0.45μm 。

渦旋混勻器。

1.2 試劑

甲醇：HPLC

乙酸銨：AR

三氯乙酸：AR

檸檬酸：AR

PH為4的水：用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)水的PH值為4

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品溶液的制備：準(zhǔn)確稱取胭脂蟲紅標(biāo)準(zhǔn)品0.0050g，置10ml容量瓶中，用PH為4的水定容至10ml，搖勻，得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（0.5mg/ml）。

供試品溶液的制備:

樣品制備：稱取一定量的市售果汁于燒杯中，50℃水浴加熱40min除去其中的二氧化碳，放置，冷卻至室溫。

試樣處理：稱取約5.000g上述樣液于50mL容量瓶中進(jìn)行加標(biāo)，將樣品用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的三氯乙酸定容至50ml,過濾。濾液備用。

凈化：用3ml甲醇和3ml水活化過的HLB固相萃取小柱，取濾液10ml，依次加入到固相小柱中，帶濾液流盡，用5ml水淋洗小柱，抽干，用3ml甲醇洗脫，收集洗脫液于50℃氮?dú)獯蹈?，?ml水溶解殘?jiān)?，?.45μm微孔濾膜過濾，上機(jī)分析。

3、色譜條件

色譜柱：Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；

流動(dòng)相：0.02mol/l乙酸銨（PH=4）：甲醇=65:35；

流速：1 mL/min；

進(jìn)樣量：20μL；

檢測(cè)波長：254nm

4、測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得

5、譜圖

5.1 胭脂蟲紅標(biāo)準(zhǔn)曲線

相關(guān)系數(shù)：R2=0.99791

5.2樣品

5.3 加標(biāo)樣品

5.4 標(biāo)準(zhǔn)品